הבדלים בין גרסאות בדף "נקודה איזואלקטרית"

 
== מיקוד איזואלקטרי ==
'''מיקוד איזואלקטרי''' הוא שיטה אנליטית לקביעת ה-pI של חלבונים, וכן להפרדת חלבונים לפי ההבדל ב-pI שלהם תוך שימוש באלקטרופוריזה. בשיטת המיקוד האיזואלקטרי מכניסיםיוצקים על פני משטח זכוכית או למבחנהפלסטיק ג'ל שבו יוצרים שכבות של חומציות שונה על ידי שימוש בחומצות ובסיסים אורגאניים בעלי משקלנקודה מולקולריאיזואלקטרית שונה,. מכניסיםבעבר למבחנההיה מקובל לצקת את הג'ל בתוך צינוריות אך בשנים האחרונות שיטה זו לא מקובלת יותר ורוב המתשמשים בשיטה זו יוצקים את הג'ל על פני משטחי פלסטיק שאליהם מתפלמר הג'ל בקשרים קוולנטיים החומרים בעלי הנקודה האיזואלקטרית השונה שהוספו לג'ל גם הם נקשרים לג'ל בקשרים קוולנטיים. על פני שכבת הג'ל מוסיפים תערובת של חלבונים וכלומפעילים מתח חשמלי גבוהה הגורם לכל חלבון לנוע בתוך הג'ל לפי המטען החשמלי שלו, הנקבע לפי ה- pH בסביבתו הקרובה. כך כל חלבון ינדוד לpHלמקום ששווהבג'ל לpIשבו ה- pH שווה ל-pI של אותו חלבון ושם הוא יעצור. כך פרדים החלבונים תוך תנועה בשדה אלקטרופורטי עד שהם עוצרים בנקודה האיזואלקטרית שלהם. ניתן לשלב בין מיקוד איזואלקטרי ו'''[[אלקטרופורזה]]''' רגילה של חלבונים המשתמשת ב-SDS כדטרגנט, לשיטה הנקראת '''[[אלקטרופורזה דו-ממדית בג'ל]]''' ומשמשת להפרדת חלבונים על ג'ל. השיטה המשולבת, אשר הומצאה בשנת [[1975]], מדויקת ויעילה בהרבה משתי השיטות כשהן מיושמות בנפרד והיא מאפשרת הפרדה בין אלפי חלבונים שונים בניסוי אחד.
 
==ראו גם==
4

עריכות