DNA רקומביננטי – הבדלי גרסאות

'''דנ"א רקומביננטי''' ('''Recombinant DNA)'''; '''rDNA''') - הינוהוא מולקולת [[DNA]] שנוצרה באופן טבעי או תוכננה במעבדה - כתוצאה מצירוף (קומבינציה) מחדש (רה) של מקטעי DNA ממקורות שונים, לרוב ממיניםמ[[מין (טקסונומיה)|מינים]] שונים של [[אורגניזם|אורגניזמים]].

מולקולות [[דנ"א]] רקומביננטי (rDNA) הנן מולקולות דנ"א המיוצרותמיוצרות לרוב בשיטות מעבדה של התערבות גנטית (כמו שיבוט מולקולרי), על מנת לחבר חומר גנטי ממספר מקורות שונים, ויצירת [[רצף גנטי|רצפים גנטים]] אשר לא היו יכולים להתקיים ביצורים חיים ללא התערבות זו. מולקולות דנ"א רקומביננטי אפשרילפעמים נקראות "'''דנ"א כימרי'''", כיוון שמולקולותשהן לרוב עשויות מחומר גנטי של שני יצורים שונים. רצפי הדנ"א המשמשים לבניית דנ"א רקומביננטי יכולים להיות במקורם מכל היצוריםיצור חולקותאו אתזן. אותולדוגמה, ה[[מבנהדנ"א כימי|מבנהצמחי הכימי]]יכול ושונותלהצטרף רקלדנ"א ברצףשל ה[[נוקלאוטידבקטריה]]י, אשראו נמצאלמשל בתוךדנ"א המבנהאנושי הכללייכול הזההלהצטרף לדנ"א של פטרייה. בנוסף, רצפי דנ"א שלא קיימים בשום מקום בטבע יכולים להיווצר על ידי הסינתזה הכימית של דנ"א, ולהשתלב יחד לדנ"א רקומביננטי.

שיבוט מולקורלרימולקולרי הינוהוא תהליך מעבדה שבו משתמשים על מנת ליצור דנ"א רקומביננטי. שיטה זו הינה אחת ממגוון שיטות קיימות, כמו תגובת השרשרת של [[פולימריזציה|פולימראז]] (PCR) המשמשת לבקר את השכפול של כל רצף DNA ספציפי. השוני העיקרי בין שתי השיטות הללו הינו ששיבוט מולקולרי כולל שכפול של הדנ"א בתוך תא חי, בעו ש-PCR משכפל דנ"א במבחנה, ללא תאים חיים.

1.# בחירה של יצור מארח ווקטור שיבוט

2.# הכנת וקטור הדנ"א

3.# הכנת הדנ"א למצב של שיבוט

4.# יצירת דנ"א רקומביננטי

5.# הצגה של הדנ"א הרקומביננטי לייצור המארח

6.# בחירה של יצורים המכילים דנ"א רקומביננטי

7.# סריקת השיבוטים עם ה- DNA רצוי והמאפיינים ביולוגיים.

לאחר השתלה לתוך האורגניזם המארח, הדנ"א הזר המוכל בתוך ה- DNA הרקומביננטי עשוי או עשוי שלא, לבוא לידי ביטוי. ייתכן כי הדנ"א פשוט ישוכפל ללא ביטוי, או שהוא יעובד ויתורגם כך שהחלבון הרקומביננטי יווצר. באופן כללי, ביטוי של גן זר דורש בנייה מחדש של הגן, כך שיכלול רצפים הדרושים לייצור מולקולת [[mRNA]] היכולה להיות בשימוש על ידי מנגנון התרגום של המארח. שינויים ספציפיםספציפיים לאורגניזם המארח יכולים להיעשות על מנת לשפר את הביטוי של הגן. בנוסף, ייתכן כי יתבצעו שינויים נוספים לרצף קידוד, על מנת לשפר את התרגום, להפוך את החלבון למסיס, לכוון את החלבון רקומביננטי למיקום התאי/ החוץ תאי הנכון ולייצב את החלבון.

אם רצפי ה-rDNA מקודדים גן, אז הופעת ה-RNA או החלבון המיוצרים על ידי הגן הרקומביננטי, ניתנים לאיתור בדרך כלל באמצעות [[RT-PCR]] או שיטות נוספות. שינויים פנוטיפים משמעותיים הם יוצאי דופן, אלא אם הגן הרקומביננטי נבחר וקודד על מנת לגרום לפעילות ביולוגית בתא המארח. פנוטיפים נוספים כוללים