חיידקים קומפטנטים – הבדלי גרסאות

תוכן שנמחק תוכן שנוסף
ילין (שיחה | תרומות)
אין תקציר עריכה
Eyal Bairey (שיחה | תרומות)
מ קישורים פנימיים והגהה קלה
שורה 1:
'''חיידקים קומפטנטים''' הם [[חיידקים]] שיכולים לעבור [[טרנספורמציה]] בקלות. לרוב, הכוונה היא לחיידקים שגודלו בתנאים מוגדרים מסויימים ועברו טיפול (למשל, על ידי החלפת מדיום הגידול שלהם בתמיסות שונות) שמגביר את חדירות הממברנהה[[קרום תא|ממברנה]] שלהם ל-[[DNA]]. כאשר מוסיפים DNA (ברוב המקרים, [[פלסמיד]]) לתמיסה בה הם נמצאים הוא נכנס לתוך תא החיידק. לעתים, משתמשים ב[[אלקטרופורציה]] על מנת להגביר את חדירות הממברנה ובה בעת להניע את ה-DNA על מנת להגביר את יעילות ה[[טרנספורמציה]]הטרנספורמציה.
==הכנת חיידקים קומפטנטים==
חיידקים קומפטנטים אפשר להכין, למשל, על ידי [[סרכוז]] תרבית חיידקים בפאזה לוגריתמית והרחפתם בתמיסת קרה עשירה ביוני [[סידן]]. לאחר ההרחפה החיידקים קומפטנטים למשך מספר דקות עד מספר שעות, אך ניתן לשמור אותם בהקפאה עמוקה לתקופות ארוכות יותר.
 
לאחר שמשהים את החיידק הקומפטנטי בתמיסה עם הפלסמיד תוך שמירה על טמפרטורה נמוכה (קרובה לאפס מעלות צלזיוס) מעלים את הטמפרטורה, מה שגורם ל"סגירת" ממברנת התא. כעת, ה-DNA נשאר בתוך תא החיידק.
==שימוש בחיידקים קומפטנטים==
המחקר המדעי ב[[ביולוגיה מולקולרית]] מושתת על החדרת והחסרת גנים בחיידקים ובאורגניזמים אחרים. במחקרים אלה משתמשים תדיר בחיידקים קומפטנטים. בנוסף, חיידקים שונים, ובעיקר ''[[Escherichia coli]]'' משמשים לייצור [[חלבונים]] שונים, חיידקיים ולא חיידקיים. לצורך כך, מחדירים את הגןה[[גן]] המקודד החלבוןלחלבון המבוקש על גבי [[פלסמיד ביטוי]] בעל [[פרומוטר]] חזק שיביא ל[[שעתוק]] הגן ול[[תרגום (ביולוגיה)|תרגום]] ה-[[RNA]] לחלבון.