RT-PCR – הבדלי גרסאות

1- שיעתוק הפוך- הפיכת RNA ל DNA משלים – [[cDNA]] בעזרת [[אנזים]] [[רוורס טרנסקריפטאז]] המופק מ[[וירוס]] משפחת [[רטרו וירוס|רטרו וירוסים]] כגון [[M-MLV]] האנזים משמש את הוירוס בהפיכת RNA ויראילי לDNA כחלק ממחזור החיים של הוירוס. פרט לאנזים מכילה הריאקציה RNA, [[נוקלאוטידים|נוקליאוטידים]] (dNTP), [[בופר]], ופריימר: בתגובת RT-PCR מקטע DNA קצר נקשר לקצהו של ה RNA- פריימר, כאשר ידוע מקטע הRNA הרצוי הפריימר יהיה ההופכי המשלים שלו, כאשר לא ידוע המקטע או יש עניין במספר מקטעים המקודדים לחלבון ניתן להשתמש בפריימר המכיל רצף בן 15-25 חומצות גרעין של [[תימין]] – poly dT. פריימר זה נקשר ל mRNA באתר ה[[פולי אדנילציה]]. כאשר מקטע הmRNA אינו מקודד לחלבון ולכן אינו מכיל אתר פולי אדנילציה כמו ב [[RNA רגולטורי]], או [[tRNA]] יש להשתמש בפרימרים אקראיים.