נוקלאוזום – הבדלי גרסאות

תוכן שנמחק תוכן שנוסף
אין תקציר עריכה
ברוקולי (שיחה | תרומות)
מאין תקציר עריכה
שורה 46:
==התקבצות הנוקלאוזום בניסוי==
[[תמונה:Nucleosome structure.png|שמאל|ממוזער|250px|שרטוט של התקבצות הנוקלאוזום]]
נוקלאוזומים יכולים להתקבץ בניסוי באמצעות שימוש בהיסטונים טבעיים מזוקקים או היסטונים [[רקומבינציהשחלוף|רקומביננטיים]] או במגוון המבנים השונים שלהם <ref> Dyer PN, Edayathumangalam RS, White CL, Bao Y, Chakravarthy S, Muthurajan UM, Luger K, [http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?cmd=Retrieve&db=pubmed&dopt=Abstract&list_uids=14870657&query_hl=1&itool=pubmed_docsum, "Reconstitution of nucleosome core particles from recombinant histones and DNA"], Methods in Enzymology (2004); 375: 23-44 </ref>. השיטה התקנית של שימוש ב[[דיאליזה|דיאליזת]] [[מלח (כימיה)|מלח]] נשענת על העובדה שהטטראמר H3-H4 נקשר ל-DNA ב[[ריכוז כימי|ריכוזי]] מלח גבוהים יותר מאשר הדימר H2A/H2B.
 
תגובה המורכבת מארבע היסטוני ליבה ותבנית DNA עירומה מבוצעת בהתחלה ב[[טמפרטורה]] של 4C בריכוז מלח של 2 מולאר. הריכוז הזה יורד בהדרגתיות באמצעות החלפה ידנית של [[בופר]], או באמצעות הזרמה של בופר בריכוז מלח נמוך לתוך התגובה כאשר במקביל שואבים החוצה את תערובת התגובה באותו קצב. ככל שריכוז המלח יורד, טטראמרים חופשיים בתמיסה מתחילים להיקשר עם תבנית ה-DNA. כאשר ריכוז המלח יורד עוד, הדימרים H2A/H2B נקשרים עם הטטראמר שעל התבנית.
 
 
 
 
==הערות שוליים==